板蓝根多糖的提取及含量测定

时间：2010-08-03 点击：次来源：阳光畜牧网作者：阳光畜牧网 - 小 + 大

结果见表1
表1不同浓度葡萄糖的吸光度
葡萄糖标准液(ml)
0.0
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
0.6
0.7
浓度(ug/ml)
0.00
1.05
2.10
3.15
4.20
5.25
6.30
7.35
吸光度值A
0.000
0.0735
0.1458
0.2235
0.2945
0.3798
0.4420
0.4973
3 多糖的提取及精制
取板蓝根洗净，晾干，精密称取100g，置索氏提取器中，依次用石油醚（60～90°C）、乙醚和80%乙醇回流提取4h。残渣用乙醚、无水乙醇反复洗涤，得板蓝根多糖。60°C烘干备用。
4 换算因素测定
精确称取60°C干燥恒重的板蓝根多糖20mg，水溶解后定容到100ml量瓶中，摇均，作为多糖储备液。
精确量取多糖储备液0.2ml，加水至1ml，按测定标准曲线同样的方法测其吸光度值。按下式计算换算因素。
f=W/CD 式中：W为多糖重量(ug)，C为多糖液中葡萄糖的重量(ug)，D为多糖的稀释倍数。测得f=4.7829。
5样品测定
精确分别称取板蓝根粉未0.2g、0.201g、0.203g，用80%乙醇回流2h，残渣挥去溶剂后，继续用水回流2h，反复洗至250ml量瓶中，定容，摇匀成为样品液。测定时，精确吸取样品液1ml，按测定标准曲线同样方法测其吸光度值，按下式计算多糖含量：多糖含量%=CDf/W*100%
式中：C为样品溶液的葡萄糖的重量(ug),D为样品溶液的稀释倍数，f为换算因素，W为样品的重量(ug)，测得平均结果为0.8099%=0.28%(n=3)
6 回收率测定
精密称取板蓝根粉未0.15g，精密加入板蓝根多糖7mg，再于索氏提取器中用80%乙醇回流2h，残渣挥去溶剂后，连续用水回流2h，反复洗至250ml量瓶中定容。摇匀后，清确移取1ml，按测定标准曲线进行提取和测定。计算多糖含量，平均回收率为98.74%,RSD=1.86%(n=5)。
7 讨论
多糖广泛存在于自然界，是多种中草药的有效成分之一，具有多种生物活性，是理想的免疫增强剂，它能提高机体免疫系统的功能，不仅能促进T细胞、B细胞、NK细胞、M细胞等免疫细胞的功能，还能促进白间素、干扰素、肿瘤坏死因子等细胞因子的产生。目前对多糖的研究方兴未艾，多糖的作用机理以及生物功能与结构的关系的研究不断深入，而且不断有新的多糖物质被发现。我们从板蓝根中提取出板蓝根多糖，并对其含量进行了测定。研究表明，板蓝根多糖含量不是很高，提取方法有待进一步改进。板蓝根多糖的结构组成和生理活性也有待进一步研究。

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