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板蓝根多糖的提取及含量测定

时间:2010-08-03    点击: 次    来源:阳光畜牧网    作者:阳光畜牧网 - 小 + 大

摘要目的:从板蓝根中提取多糖,并测定其含量。方法:用水提醇沉法提取板蓝根多糖,用酚-硫酸比色法测定多糖含量。结果:测得板蓝根中多糖含量0.8099%,平均回收率为98.74%,RSD=1.86(N=5)。结论:板蓝根多糖含量不是很高,提取方法有待进一步改进。 关健词:板蓝根多糖提取含量测定

板蓝根(Indigowoad root)为十字科植物菘蓝的根。菘蓝是二年生草本,植株高50~100cm,花期4~5月,果期5~6月。我国许多地区都有分分,主产于河北安国,江苏如皋、南通等地,各地亦有栽培。板蓝根呈圆柱形,稍扭曲,长10~20cm,直径0.5~1cm,气微,味微甜后苦涩。板蓝根含靛蓝,多种氨基酸,另含有12%氯基酸的蛋白多糖。板蓝根有抑菌作用,对实体瘤有一定治疗作用。板蓝根多糖25mg/kg、50mg/kg、100mg/kg腹腔注射可明显增强小鼠对二硝基氯苯的迟发型变态反应,诱导体内淋巴细胞转化和增强脾细胞的自然杀伤活性,腹腔注射板蓝根多糖50mg/kg,可显著促进小鼠免疫功能,增强抗体形成细胞功能,增加小鼠静注碳廓清速率。
本实验对板蓝用石油醚、乙醚除去脂溶性杂质,用80%乙醇提取除去所含单糖、低聚糖及苷类等干扰性成分后,再用水提醇沉法制得板蓝根粗多糖,并采用酚-硫酸比色法对其多糖含量进行测定。
1 仪器、试剂及样品
UV-2401 PC紫外分光光度计(日本岛津),索氏提取器。
葡萄糖(105°C干燥恒重),苯酚(AR),硫酸(AR)。
板蓝根:采自本校药园,秋季挖根,洗净晾干,破碎后备用。
2 标准曲线的绘制
2.1 标准葡萄糖溶液的配制
精密称取干燥恒重的葡萄糖25.2mg,加适量水溶解,转移至250ml量瓶中,加水至刻度,摇匀,配成浓度为100.8ug/ml标准葡萄糖溶液备用。
2.2 5%苯酚试剂的配制
取苯酚100g,加铝片0.1g和NaHCO30.05g,蒸馏,收集182。C馏份,称取7.5g,加水150ml溶解,置棕色瓶内放冰箱备用。
2.3 标准曲线绘制
精确量取葡萄糖标准溶液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7ml置干燥试管中,分别加水使成1.0ml,再分别加入5%苯酚溶液1.6ml,摇匀,然后加H2SO4 7.0ml,充分摇匀,室温放置25min,在400~600nm处测定其最大吸光度,同时做一空白。

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