奶牛布病免疫抗体与自然感染抗体鉴别诊断的探索

3）试验结果 在试验奶牛场采集免疫18个月内奶牛血样5,179份，进行虎红平板凝集试验筛选，阳性数3,211份，阳性率62%（见表2）。抽检阳性血样392份进行布病抗体竞争ELISA试验，阳性数321份，符合率81.88%（见表3）。选择布病竞争ELISA试验阳性的血清150份（无症状牛）进行布病琼脂扩散试验，结果显示抗体均为阴性（见表4）。

4）结论与分析 免疫18个月内无临床症状牛群，虎红平板凝集试验，竞争ELISA试验为阳性均不能区分是免疫抗体还是野毒抗体。通过琼脂扩散试验复核，虎红平板凝集试验阳性样本，琼扩均为阴性，且临床健康，可视为抗体为疫苗抗体。

2.3 鉴别诊断筛选方案（三）

1）试验对象 采集免疫接种18个月内，个别出现临床症状的奶牛群血样279份。

2）试验方法 ①虎红平板凝集试验参照GB/T 18646—2018动物布鲁氏菌病诊断技术中4.4操作；②试管凝集试验参照GB/T 18646—2018动物布鲁氏菌病诊断技术中4.6操作；③竞争酶联免疫吸附试验（cELISA）参照GB/T 18646—2018动物布鲁氏菌病诊断技术中4.9操作；④布鲁氏菌抗体琼扩（AGID）试验参照2.2之2）中方法操作。

3）试验结果 采用虎红平板凝集试验筛选出181份阳性牛血，再采用试管凝集试验复核阳性150份（1:100血清稀释管内出现“++”以上凝集现象），将检测阳性的血样进行布病琼脂扩散试验，阳性17份，具体见表5。

4）结论与分析 免疫接种18个月内个别出现临床症状的奶牛群，虎红平板凝集阳性和试管凝集阳性不能判定免疫抗体还是野毒抗体，琼脂扩散复核后阳性，且有临床症状的个体视为野毒感染。即免疫期在18个月内的非健康奶牛群，结合流行病学调查，临床症状，进行虎红平板凝集试验和试管凝集试验以及布病琼脂扩散试验区分自然感染抗体与免疫抗体鉴别诊断，琼扩复核阳性个体视为野毒感染牛。

2.4 鉴别诊断筛选方案（四）

1）试验对象 免疫情况不明，曾出现个别流产现象牛群，且虎红平板凝集试验、试管凝集试验均为阳性的25份样品。

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