猪圆环病毒2型检测技术研究进展

8、其他分子生物学方法

光学表面等离子体共振（SPR）免疫测定法是一种非破坏性、无标记、实时的检测方法。SPR是一种物理光学现象，SPR信号随金属表面折射率的变化而变化，通过SPR角的生物反应过程的动态变化可以获得生物分子相互作用的特定信号。HuJ等基于表面等离子体共振（SPR）并建立了特殊的分子鉴定膜，研究了一种灵敏且无标记的分析方法，用于检测血清样品中PCV2。SPR生物传感方法的理论检测限计算为0.04μg/mL。相应地，回收率从81.0%到89.3%不等，与PCV2检测试剂盒相比，该表面等离子体共振生物传感系统通过线性度、精度和恢复率进行了验证，证明了表面等离子体共振免疫测定是可靠和稳健的。

9、免疫学检测

酶联免疫吸附测定

酶联免疫吸附测定（ELISA）方法是利用抗原抗体之间专一性结合的特性，通过特异性显色反应对抗原或抗体进行检测。该方法具有特异性高、操作简便、耗时少、结果便于观察等优点，目前被广泛研究和应用。常见的ELISA检测方法有：间接ELISA，双抗夹心ELISA，竞争性ELISA。

免疫层析试纸条

免疫层析是出现于20世纪80年代初期的一种新型的，快速的免疫分析方式。将特异的抗体先固定于硝酸纤维素膜的某一区带，当该干燥的硝酸纤维素一端浸入待测样品后，由于毛细管作用，样品将沿着该膜向前移动，当移动到固定有抗体的区域时，样品中相应的抗原与该抗体发生特异性结合，用免疫胶体金染色可使该区域显示一定的颜色，从而实现特异性的免疫诊断。该试纸可用作现场快速诊断PCV2抗体的候选方法。

其他免疫学方法

单结构域抗体（sdAbs）和碱性磷酸酶（AP）的融合已被证明可用作免疫诊断试剂，psdAb-AP融合效率高，需要更少的操作步骤，并且能在短时间内结束测定。YangS等描述了一种与碱性磷酸酶（AP）融合的单结构域抗体（sdAbs）用于检测PCV2，为了评估psdAb-AP融合作为诊断试剂的实用性，将融合用于蛋白质印迹（WB）、直接ELISA和免疫细胞化学测定（ICC）。结果表明，sdAbs与AP的融合为开发更优质的免疫试剂提供了有价值的途径，为PCV2检测提供了一种简单，方便和灵敏的方法。

10、小结

PCV2引起的猪圆环病毒病的发生对生猪生产有着重大影响，预防和控制该类疾病对于最大限度地减少经济损失至关重要。PCV2的检测技术数不胜数，其中病毒分离鉴定方法因其耗时长，血清成本高等缺点不适于常规检测。电镜观察也因为电子显微镜设备价格较高，难以与同种属病毒区别等劣势同样不适于常规检测。目前，PCV2在分子生物学方面的抗原检测方法研究较多，如PCR，LMAP，RPA，RAA，ISH等；而免疫学检测方法研究较少，如ELISA，免疫层析等。许多研究人员对常用的抗原抗体检测方法以外的新型检测方法做了一些探索，发表了一些具备良好应用前景的PCV2检测鉴定方法，但仍需继续发现更先进、更高效的临床检测技术，为临床兽医科技工作者建立快速、简便、准确、实用的PCV2检测方法提供参考。

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